บทบาทของ Taq polymerase ใน PCR

ผู้เขียน: Frank Hunt
วันที่สร้าง: 15 มีนาคม 2021
วันที่อัปเดต: 2 พฤษภาคม 2024
Anonim
Taq DNA polymerase
วิดีโอ: Taq DNA polymerase

เนื้อหา

PCR เป็นวิธีการที่นักวิทยาศาสตร์ใช้ในการทำสำเนาส่วนล้าน ๆ ของ DNA โพลิเมอร์ - เอนไซม์โปรตีนชนิดหนึ่ง - ช่วยสร้างเซ็กเมนต์ใหม่ นักวิทยาศาสตร์มักใช้ Taq พอลิเมอเรสใน PCR


PCR สร้างสำเนาหลายชุด (รูปแบบดีเอ็นเอโดย araraadt จาก Fotolia.com)

ประวัติศาสตร์

Taq polymerase มาจากแบคทีเรีย Thermus aquaticus ซึ่งอาศัยอยู่ในน่านน้ำร้อน Kary Mullis และ Fred Faloona พัฒนา PCR ในช่วงกลางทศวรรษ 1980 โดยใช้ Escherichia coli polymerase แต่ในไม่ช้านักวิทยาศาสตร์ก็เริ่มใช้ Taq ใน PCR เพราะทนต่ออุณหภูมิสูงได้ดีกว่า

ฟังก์ชัน

PCR เกี่ยวข้องกับขั้นตอนของการสูญเสียสภาพธรรมชาติการหลอมและการทำซ้ำมักจะทำซ้ำ 20 ถึง 30 ครั้ง การสูญเสียสภาพธรรมชาติจะแบ่งดีเอ็นเอสองเส้นออกเป็นเส้นเดี่ยว ๆ ในขั้นตอนการหลอมไพรเมอร์จะผูกกับส่วนดีเอ็นเอที่จะทำการคัดลอก Taq พอลิเมอเรสเริ่มทำงานในขั้นตอนของการจำลอง: โพลิเมอร์ประกอบจากดีเอ็นเอแต่ละเส้นที่ทำเครื่องหมายโดยไพรเมอร์ซึ่งเป็นเส้นคู่ใหม่

ผลประโยชน์

อุณหภูมิสูงที่ต้องใช้ในการทำลาย DNA ทำลายเชื้อ E. coli polymerase ที่ใช้ในเครื่อง PCR ซึ่งจำเป็นต้องเพิ่มเอนไซม์เพิ่มเติมในแต่ละรอบ Taq polymerase สามารถทนต่ออุณหภูมิเหล่านี้ได้ดังนั้นนักวิทยาศาสตร์สามารถทำ PCR หลายรอบโดยอัตโนมัติ


การพิจารณา

Taq พอลิเมอเรสมีอัตราความผิดพลาดที่เพิ่มขึ้นเป็นสองเท่าของ DNA โพลีเมอร์ตัวอื่นที่มีความเสถียรที่อุณหภูมิสูงนั้นมีอัตราความผิดพลาดต่ำกว่า แต่ Taq ยังคงเป็นที่นิยมใช้มากที่สุดเนื่องจากความน่าเชื่อถือและความเอนกประสงค์